Calcul de l’activité enzymatique
Comprendre le Calcul de l’activité enzymatique
Dans le cadre d’une étude sur une nouvelle enzyme, vous devez déterminer son activité spécifique en laboratoire. L’activité enzymatique est mesurée par la quantité de substrat converti par minute par mg de protéine enzyme.
Données :
- Volume de la réaction : 100 mL
- Concentration initiale du substrat : 0.2 mM
- Concentration du substrat après 10 minutes de réaction : 0.15 mM
- Quantité totale de protéine enzymatique utilisée : 50 µg
Question :
Calculez l’activité spécifique de l’enzyme en µmol de substrat converti par minute par mg de protéine.
Correction : Calcul de l’activité enzymatique
1. Calcul de la quantité de substrat converti
Pour mesurer l’activité enzymatique, il faut déterminer combien de substrat a été transformé pendant la réaction. Cette quantité est la différence entre la concentration initiale et la concentration finale du substrat.
Formule :
- \(\Delta \text{Substrat}\):
\[ = \text{Concentration initiale} – \text{Concentration finale} \]
Données :
- Concentration initiale du substrat = 0.2 mM
- Concentration finale du substrat = 0.15 mM
Calcul :
\[ \Delta \text{Substrat} = 0.2 \, \text{mM} – 0.15 \, \text{mM} \] \[ \Delta \text{Substrat} = 0.05 \, \text{mM} \]
2. Conversion de la quantité de substrat converti en micromoles
Le résultat obtenu en mM doit être converti en micromoles pour être utilisé dans le calcul de l’activité spécifique. Pour cela, multiplions le changement de concentration par le volume de la réaction converti en litres.
Formule :
- \(\text{Quantité en micromoles}\):
\[ = \Delta \text{Substrat} \times \text{Volume de la réaction (L)} \]
Données :
- Volume de la réaction = 100 mL = 0.1 L
Calcul :
\[ \text{Quantité en micromoles} = 0.05 \, \text{mM} \times 0.1 \, \text{L} \] \[ \text{Quantité en micromoles} = 5 \, \text{µmoles} \]
3. Calcul de l’activité spécifique de l’enzyme
L’activité spécifique est calculée en divisant la quantité de substrat converti en micromoles par le temps de réaction et par la quantité de protéine utilisée. Cela nous donne l’efficacité de l’enzyme en termes de quantité de substrat qu’elle peut convertir par unité de temps et par unité de masse de protéine.
Formule :
- \(\text{Activité spécifique}\):
\[ = \frac{\text{Quantité de substrat converti (µmoles)}}{\text{Temps de réaction (min)} \times \text{Quantité de protéine (mg)}} \]
Données :
- Temps de réaction = 10 minutes
- Quantité de protéine enzymatique = 50 µg = 0.05 mg
Calcul :
\[ \text{Activité spécifique} = \frac{5 \, \text{µmoles}}{10 \, \text{min} \times 0.05 \, \text{mg}} \] \[ \text{Activité spécifique} = \frac{5}{0.5} \] \[ \text{Activité spécifique} = 10 \, \text{µmoles/min/mg} \]
Conclusion :
L’activité spécifique de l’enzyme, calculée correctement en unités de µmoles/min/mg, est de 10 µmoles par minute par mg de protéine. Ce résultat reflète la capacité de l’enzyme à transformer le substrat sous les conditions expérimentales données.
Calcul de l’activité enzymatique
D’autres exercices de biochimie:
0 commentaires